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ENSAYOS PARA DIAGNOSTICAR ENFERMEDADES TRANSMITIDAS POR INSECTOS

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Solución de problemas con ensayos de inmunofluorescencia


Problema: Antígeno lavado durante el procedimiento.

 

Causas posibles:


1. Es posible lavar demasiado una extensión de sustrato. Se recomienda lavar las extensiones suavemente con un frasco de enjuague que contenga solución amortiguadora de enjuague, en especial las utilizadas para los ensayos de IgG. Dirija el chorro de la solución amortiguadora de enjuague para que caiga suavemente en el centro de la extensión, no sobre los pocillos de antígenos. No sumergir en solución amortiguadora de enjuague durante períodos prolongados ni empapar con agua destilada, simplemente usar el frasco de enjuague 3 veces y aplicar el conjugado. Para los ensayos de IgM, después del tercer lavado, se recomienda dejar la solución amortiguadora de enjuague sobre los pocillos de la extensión durante varios minutos antes de retirarla y agregar el conjugado.
   
2. Si solo los sueros tienden a eliminar el sustrato, el problema podría deberse a proteasas bacterianas causadas por desarrollo de bacterias en los sueros.
   
3. Si la pérdida de sustratos se da en forma de parches o líneas, es posible que un técnico haya rayado el sustrato al aplicar los sueros o el conjugado mientras realizaba el ensayo. La aplicación de los sueros o el conjugado debe realizarse desde el borde de los pocillos de sustrato.
   
   

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